这项研究的目的是表征精液冷冻保存前后，血管紧张素转化酶（tACE）的睾丸同工型以及来自内罗尔公牛的精子的顶体反应。 使用10具性成熟的Nelore公牛的射精。 收集精液后，将1.0 mL射精用于分析，其余部分进行冷冻保存。 将冷冻前的新鲜精液和冷冻/解冻的精液离心两次，然后将沉淀重新悬浮于酪氨酸的乳酸丙酮酸白蛋白（TALP）中。 此后，制备100μL包含100×106精子的等分试样。 将样品的等分试样用于蛋白质印迹分析，进行电容化，然后，在体外进行顶体反应测定。 借助抗ACE单克隆抗体，在内罗尔公牛的精子中鉴定出100 kDa的蛋白带。 冷冻保存使蛋白质印迹法获得的蛋白条带强度降低到冷冻前观察