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目的:克隆、表达并纯化大肠杆菌M15碱性磷酸酶(EAP)成熟肽(phoA),分析其活性。方法:采用PCR技术从M15基 因组DNA中扩增出phoA编码基因;构建其原核表达载体pCold—TF—EAP;转入E洲f BL21(DE3)进行表达;IMAc Ni—NTA柱 层析法纯化重组蛋白;重组蛋白与底物