高速铁路建成后客运通道内的线路组成要素及线路功能将发生较大变化，旅客列车在通道内的线路选择方案也需要进一步优化。采用蚁群算法（ACO）对旅客列车的线路选择进行了设计，给出了转移概率及信息量更新方法，并采用对每个蚁群单独寻优的思路，制定了相应的求解策略。经过实例验证，取得了较好的结果，为今后基于路网条件下的旅客列车线路选择方案决策优化提供了一种新的参考方法。