背景：哺乳动物的卵巢中有卵泡，卵泡中含有被颗粒细胞层（GC）包裹的卵母细胞。 卵泡的生长和卵母细胞的成熟度在很大程度上取决于GC的数量和生存能力，但是尚无成熟，可靠的方法来评估单个卵泡中的可行GC的数量。 方法：优化离心条件和锥虫蓝（TB）排除试验，以降低与卵泡中GC数量兼容的低细胞密度。 小鼠卵巢卵泡被分解产生一个单细胞GC悬浮液，该细胞悬浮液通过TB（n = 4）进行检测，但在体外培养24 h（n = 3）后，也可以通过96孔板形式的结晶紫分析进行检测。 通过使用酶联免疫测定法定量GC产生的抗Mullerian激素（AMH）和雌激素，进一步表征了体外GC的生存能力。 结果：离心和低细胞密度