壳聚糖酶EAG1是一种来自Ehimensis的经典糖苷水解酶,在较高温度下相对不稳定。 该缺点严重限制了其工业应用。 因此,弄清热稳定性的理论基础并生产具有高活性和稳定性的酶至关重要。 使用结构建模和分子动力学模拟,残基Leu84,Gly113,Asp116,Ala207和Leu286被认为是结构稳定性的关键残基。 然后将预测的残基Leu84突变为ALA。 结果表明,L84A突变可以提高壳聚糖酶EAG1的热稳定性。 与以前的研究一起,G113C,D116C,A207C和L286C的突变形成两个硫键可以改变EAG1的热稳定性。 结果表明,可以通过对保守残基进行定点诱变来设计EAG1的热稳定性。